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在人類探索科學奧秘的征程中，最深邃、最復雜的領域不只有遙不可及的星河，還有近在咫尺的大腦。這座由數百億神經元和數百萬億突觸交織而成的“小宇宙”，如何在其自然運作的狀態(tài)下被清晰觀測，一直是科學家面臨的巨大挑戰(zhàn)。近日，由北京大學程和平院士與王愛民教授團隊聯手北京信息科技大學吳潤龍教授團隊所取得的突破，正為這個世界級難題提供了一把鑰匙——他們成功研制出僅重2.6克的多色微型化雙光子顯微鏡，首次實現自由活動小鼠高分辨率的深腦雙光子彩色成像，為大腦打開了一扇“彩色視窗”。這項成果日前發(fā)表于國際學術期刊《自然·方法》，并獲同期研究簡報特別推介。

記者了解到，自2014年程和平牽頭國家重大科研儀器研制項目以來，團隊先后完成四次技術迭代。從2017年第一代僅重2.2克、首次實現自由活動動物突觸水平成像的微型顯微鏡，到2021年第二代視野擴大7.8倍并實現三維成像，再到2023年第三代借助三光子成像穿透至深腦海馬區(qū)——每一步都凝聚著跨學科合作的智慧與堅持。

而最新問世的第四代系統(tǒng)，更是在多色激發(fā)、深腦成像與多尺度觀測三個維度齊頭并進，實現了標志性的技術突破。其中，團隊成功研制出700至1060納米超寬帶反諧振空芯光纖，一舉解決了傳統(tǒng)帶隙空心光子晶體光纖僅支持單色激光的限制。這項革新使得多波長飛秒脈沖激光得以低損耗、低色散地傳輸，從而為同時觀測多種細胞功能結構奠定了物理基礎。

正如吳潤龍所說：“這相當于在給大腦‘彩色直播’神經元與細胞器的動態(tài)活動?！痹诎柎暮Ｄ∧Ｐ托∈髮嶒炛?，團隊成功同步捕獲了神經元鈣信號、線粒體鈣信號和淀粉樣斑塊沉積的三色影像，并發(fā)現疾病早期的線粒體鈣動力學異?！@不僅展示了儀器強大的功能，更體現了其在揭示神經疾病機制方面的巨大潛力。

在深腦成像方面，新一代顯微鏡同樣實現跨越式進展。吳潤龍介紹，通過精密光學設計與系統(tǒng)級的像差校正，團隊將成像深度推進至850微米皮層區(qū)域，比此前微型雙光子顯微鏡的深度提升了三倍以上，使得觀測自由活動動物大腦深層結構中的神經活動不再是夢想。

更令人稱道的，是該系統(tǒng)在成像尺度上的無縫切換能力。團隊創(chuàng)新設計了三款可快速替換的齊焦物鏡，分別適用于高分辨率精細成像、大視場觀測和高性能信號收集。團隊成員演示時僅用30秒便完成物鏡更換，屏幕上實時影像即刻由“精微特寫”轉變?yōu)椤皬V角全景”，真正實現了“換物鏡如擰螺釘”般便捷高效的多尺度觀測。

程和平說，多年來，多色熒光標記無創(chuàng)深腦成像能力只能在大型臺式設備上實現，團隊首次解決了微型化雙光子顯微鏡多色激發(fā)成像的難題，為研究大腦復雜網絡帶來突破性進展。未來，該技術將在理解腦認知原理、腦疾病機制研究、神經藥物評估以及腦機接口等領域具有廣泛應用前景。